粉色视频APP在线观看下载无限晶体,东北老妇爽大叫受不了,和姐姐同居的日子,国产99在线 | 欧美

銷售熱線

19126518388
  • 技術(shù)文章ARTICLE

    您當(dāng)前的位置:首頁 > 技術(shù)文章 > 神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)

    神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)

    發(fā)布時(shí)間: 2023-01-05  點(diǎn)擊次數(shù): 1150次

    材料與儀器

    大鼠
    CMF-Hanks液 胰蛋白酶 DMEM F12
    水浴鍋 培養(yǎng)箱

    步驟

    一、原代培養(yǎng)

    1.  選用生后1周的新生大白鼠,用碘酒,酒精棉球消毒,斷頭取其大腦皮層組織。
     
    2.  解剖顯微鏡下,剝離腦膜,切除大腦髓質(zhì)部分。
     
    3.  將大腦皮質(zhì)在無Ca2+、Mg2+Hanks液(CMF-Hanks液)中剪碎。
     
    4.  室溫下靜置10 min。
     
    5.  在37℃水浴箱中用0.125%的胰蛋白酶(用CMF-Hanks液配制)消化30 min。
     
    6.  加入少許含20%血清的DMEM/F12(DMEM與F12為1:1)混合培養(yǎng)液(下同),用吸管稍加吹打至胰酶液與培養(yǎng)液混勻。離心5 min(1 000 r/min)。
     
    7.  吸去上清含酶液,重新加入含血清培養(yǎng)液,用吸管反復(fù)吹打至組織塊消散為止。制成細(xì)胞懸液(暫稱初細(xì)胞懸液)。
     
    8.  將初細(xì)胞懸液接種到玻璃瓶(或培養(yǎng)皿)中,于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中孵育30 min。
     
    9.  翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶,吸出瓶中的細(xì)胞懸液。用孔徑為75μm的不銹鋼網(wǎng)過濾。
     
    10.  將濾過液離心10 min(1 000 r/min),濃縮成約3ml的細(xì)胞懸液(暫稱為次細(xì)胞懸液)。
     
    11.  將次細(xì)胞懸液種植到預(yù)先涂布有多聚賴氨酸的培養(yǎng)瓶中。接種的細(xì)胞密度約1×104個(gè)/cm2。
     
    12.  置CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3-5h,再補(bǔ)加足夠的培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)9-14 h。培養(yǎng)液顏色略微變黃時(shí)換液。

    二、原代培養(yǎng)物的傳代
     
    1.  吸取舊培養(yǎng)液用CMF-Hanks液洗滌2次。
     
    2.加入少許0.125%的胰蛋白液消化15 min。以有血清培養(yǎng)液終止胰酶活性。
     
    3.稍事手動(dòng)搖晃,倒掉含酶液。加入有血清培養(yǎng)液。
     
    4.用吸管反復(fù)吹打使細(xì)胞從培養(yǎng)瓶壁脫落。收集細(xì)胞懸液,離心10 min(1 000 r/min)。棄上清液,給細(xì)胞沉淀物再加入培養(yǎng)液制成細(xì)胞懸液。
     
    5.重復(fù)原代培養(yǎng)時(shí)8-10步。
     
    6.將細(xì)胞懸液按0.5×105個(gè)/cm2的密度種植在經(jīng)鼠尾膠原包被的培養(yǎng)瓶中。
     
    7.送入CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3-5 h,再加足夠的培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。

    三、結(jié)果

    分離的大鼠大腦皮質(zhì)細(xì)胞在原代培養(yǎng)4 h后,部分細(xì)胞即可長出細(xì)小胞突。培養(yǎng)3-4 d之后,細(xì)胞數(shù)量便明顯增大。大鼠大腦皮質(zhì)細(xì)胞原代培養(yǎng)一般在9-14 d,以星形膠質(zhì)細(xì)胞為主的細(xì)胞即可長滿培養(yǎng)瓶壁。


    以上就是本期的內(nèi)容,更多資訊,歡迎點(diǎn)擊安培生物網(wǎng)站鏈接了解更多技術(shù)與產(chǎn)品資訊。


    安培生物科技有限公司介紹:

    安培生物堅(jiān)持為生命科學(xué)研究、活體動(dòng)物轉(zhuǎn)染、大規(guī)模生物生產(chǎn)、基因和細(xì)胞治療領(lǐng)域客戶,提供*細(xì)胞體內(nèi)可代謝的核酸轉(zhuǎn)染試劑;inviCELL™Platelet lysate無動(dòng)物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細(xì)胞擴(kuò)增和生產(chǎn),包括培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞和多種免疫細(xì)胞系等,為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無血清細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)模生產(chǎn)服務(wù);提供以植物生物為平臺(tái)基因序列全人源化、*的細(xì)胞培養(yǎng)可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品;提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL、對(duì)細(xì)胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。安培生物專注為生物醫(yī)藥領(lǐng)域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù),努力發(fā)展為基因治療、細(xì)胞治療的生物科技企業(yè)。


產(chǎn)品中心 Products
新绛县| 桃园县| 普宁市| 光山县| 泰来县| 屯门区| 嘉兴市| 桐城市| 青田县| 连平县| 年辖:市辖区| 台东县| 天全县| 杨浦区| 青河县| 淮阳县| 区。| 安多县| 金湖县| 贺兰县| 太仓市| 合江县| 山阳县| 科技| 嵊州市| 万安县| 望城县| 古浪县| 阿拉善右旗| 汝城县| 六枝特区| 米泉市| 施秉县| 巫溪县| 阳信县| 东兴市| 辉南县| 读书| 大悟县| 阿克苏市| 石城县|